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产品名称：Biotin-PEG2000-MAL，生物素-聚乙二醇2000-马来酰亚胺

1. 分子结构与功能模块化

生物素（Biotin）：

高亲和力结合：与链霉亲和素/抗生物素蛋白结合常数（Kd ~10-15 M），用于蛋白纯化、生物传感器或靶向递送。

多价效应：可设计多臂PEG（如分支型）增强结合稳定性。

PEG2000链：

亲水屏障：分子量2000对应流体力学半径~3.2 nm（理论计算），介于肾滤过阈值（~5 nm）与细胞摄取优化尺寸之间。

柔性间隔：延长生物素与靶蛋白距离，减少空间位阻干扰。

马来酰亚胺（MAL）：

巯基特异性：pH 6.5-7.5下与蛋白自由巯基（-SH）形成稳定硫醚键，反应速率常数~100-1000 M-1s-1。

稳定性：需避光储存（尤其水性溶液易水解），反应前建议氮气脱氧。

2. 合成与质量控制关键点

多步偶联策略：

PEG2000-NH₂活化：将PEG末端羧酸转化为氨基（如EDC/NHS法）。

生物素偶联：利用生物素的羧酸与PEG-NH₂进行酰胺反应（pH 7.5-8.0，HATU催化）。

马来酰亚胺修饰：PEG另一端氨基与MAL-NHS酯反应（pH 8.5-9.0，严格控温避光）。

关键质控指标：

HPLC纯度：检测未反应PEG及水解副产物（如开环马来酰亚胺）。

生物素活性：通过链霉亲和素-HRP显色法定量（参考标准生物素-BSA）。

马来酰亚胺定量：Ellman试剂（DTNB）检测自由巯基消耗（ε412=14,150 M-1cm-1）。

流体力学半径：动态光散射（DLS）验证尺寸分布（PEG2000理论Rh≈2.3 nm，实测因构象差异可能增至3.2 nm）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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