产品名称:Cy5标记胆固醇,近红外染料Cy5-Chol的合成与制备
合成与制备
1 合成步骤
胆固醇活化:
羟基活化:胆固醇的羟基通过与琥珀酸酐反应转化为羧酸基团,形成胆固醇琥珀酸酯(Chol-SA)。
条件:在DMF溶剂中,加入催化剂(如DMAP),室温下反应4-8小时。
Cy5标记:
反应:Chol-SA的羧酸基团通过EDC/NHS催化与Cy5的氨基反应,形成稳定的酰胺键。
条件:在pH 7.5-8.5的缓冲液中,Cy5与Chol-SA的摩尔比为1:1至5:1,室温下反应2-4小时,避光进行。
纯化与表征:
纯化:通过透析或HPLC去除未反应的Cy5和小分子副产物。
表征:使用¹H NMR确认Cy5的接枝率,通过荧光光谱仪检测发射强度。
2 质量控制
纯度检测:HPLC确认主峰纯度>95%,游离Cy5和胆固醇残留量<5%。
功能验证:
荧光效率:荧光光谱仪检测Cy5的发射强度。
脂质体稳定性:在生理条件(如血清、不同pH)下评估脂质体的粒径变化和药物释放曲线。
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