产品名称:FITC-streptavidin,异硫氰酸酯荧光素-链霉亲和素的物理化学性质
一、化学结构与基本信息
化学名称:FITC-Maleimide(异硫氰酸酯荧光素-马来酰亚胺)
结构组成:
FITC(异硫氰酸荧光素):一种绿色荧光染料,分子结构中含有异硫氰酸酯基团(-N=C=S),该基团能与生物大分子中的伯胺(-NH₂)发生反应,从而将荧光素连接到生物大分子上。
马来酰亚胺(Maleimide):一种具有高度反应性的化合物,其结构中含有一个碳碳双键和一个羰基(-CO-)连接的环状结构。在生物化学应用中,马来酰亚胺基团可以和蛋白质等生物分子中的巯基(-SH,常见于半胱氨酸残基)发生反应,形成稳定的硫醚键(-S-)。
连接方式:FITC与马来酰亚胺可能通过聚乙二醇(PEG)链连接,形成FITC-PEG-MAL结构,其中PEG作为连接臂,提高水溶性和稳定性。
二、物理化学性质
溶解性:水溶性,可溶于PBS或其他缓冲液,也溶于有机溶剂如DMSO。
稳定性:需避光、干燥、低温(-20℃)保存,避免反复冻融。马来酰亚胺基团对温度敏感,需在低温下保存以保持活性。
光谱特性:
吸收波长(Ex):约495 nm
发射波长(Em):约519 nm
荧光特性:绿色荧光,量子产率高,光稳定性好。
三、合成方法
原料准备:FITC、带有合适官能团的PEG衍生物(如一端带氨基,另一端带羧基的PEG链)、马来酰亚胺试剂。
连接FITC与PEG:在碱性缓冲溶液(如碳酸钾缓冲液)中,FITC的异硫氰酸酯基团与PEG的氨基发生亲核加成反应,形成硫脲键。
引入马来酰亚胺基团:在缩合剂(如EDC)和催化剂(如NHS)的作用下,马来酰亚胺试剂与FITC-PEG中间体上的羧基发生反应,形成酰胺键,从而将马来酰亚胺基团连接到FITC-PEG上。
产物纯化:通过柱层析、透析等方法去除未反应的原料和副产物,得到纯净的FITC-PEG-MAL。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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