CY5.5转铁蛋白,CY5.5-Transferrins的纯化与表征
CY5.5-Transferrin 是将近红外荧光染料 CY5.5 与转铁蛋白(Transferrin, Tf)共价偶联制备的标记蛋白分子。转铁蛋白是一种铁结合血浆蛋白,具有多赖氨酸氨基和半胱氨酸硫醇,可与 CY5.5-NHS 或马来酰亚胺反应形成共价键。偶联完成后,必须通过纯化手段去除未反应染料及副产物,以获得高纯度、结构完整且功能保持的 CY5.5-Tf。
纯化方法:
透析:使用适当分子量截断的透析膜,将偶联反应产物与小分子染料及副产物分离,保持蛋白在缓冲液中稳定。
凝胶过滤(尺寸排阻色谱):通过 Sephadex G-25、G-50 或 Superdex 栏柱,分离高分子蛋白与低分子染料,获得纯度高、聚集状态稳定的 CY5.5-Tf。
离心过滤:利用分子量截断膜(如 10 kDa)对反应体系进行浓缩和洗涤,去除未结合的 CY5.5 并恢复蛋白体积和浓度。
表征手段:
紫外-可见光谱(UV-Vis):测定 CY5.5 的吸收峰(约 675–680 nm)及蛋白吸收峰(280 nm),可用于估算染料标记密度。
荧光光谱:检测 CY5.5 的近红外发射峰(约 710–720 nm),确认标记成功并评估荧光强度。
SDS-PAGE:通过凝胶电泳分析偶联蛋白的分子量和完整性,同时使用近红外成像仪可直接观察状态。
动态光散射(DLS)或质谱:评估蛋白聚集状态、粒径分布及偶联均一性。
CY5.5-Tf 保留了转铁蛋白的水溶性和受体结合能力,同时具备近红外荧光可追踪性,可用于体外细胞摄取实验、体内成像以及纳米载体靶向递送研究。高纯度和良好表征保证其在实验中的可靠性和可重复性,为生物成像、药物递送系统及蛋白研究提供稳定实验基础。
产品名称:CY5.5转铁蛋白,CY5.5-Transferrins
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23