产品名称:127062-22-0,Sulfo-Nhs-LC-Biotin,长链水溶性生物素化
Sulfo-NHS-LC-Biotin(长链水溶性生物素化试剂)的 CAS 号为 127062-22-0,是一种用于生物分子(如蛋白质、抗体、多肽等)生物素化修饰的化学试剂,其分子结构由生物素基团、长链连接臂(LC,即长臂)、Sulfo-NHS(磺化 N - 羟基琥珀酰亚胺)活化基团三部分组成,各部分的设计使其兼具水溶性、高反应活性和低空间位阻的优势,在生物医学研究和诊断领域应用广泛。
Sulfo-NHS 基团是该试剂的活化单元,负责与生物分子中的氨基(-NH₂)发生反应:Sulfo-NHS 通过酯键与生物素 - 长链连接臂相连,当与含氨基的生物分子接触时,会发生亲核取代反应,释放 Sulfo-NHS 离去基团,形成稳定的酰胺键,将生物素基团共价结合到生物分子上。与普通的 NHS 活化生物素(如 NHS-Biotin)相比,Sulfo-NHS-LC-Biotin 中的磺酸基(-SO₃H)显著提高了试剂的水溶性,使其可在纯水溶液中反应,无需添加有机溶剂,避免了有机溶剂对生物分子(尤其是蛋白质、酶等)活性的破坏,适用于对溶剂敏感的生物样本。
长链连接臂(通常为含 6 个碳原子的烷基链)的引入是该试剂的重要设计特点:连接臂将生物素基团与被修饰的生物分子隔开,减少了生物素与生物分子本身之间的空间位阻。在后续的检测中,生物素需与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)结合,若连接臂过短,生物素可能因被生物分子的空间结构遮挡而无法与链霉亲和素有效结合,影响检测效率;长链连接臂则解决了这一问题,使生物素基团能自由暴露,与链霉亲和素形成稳定的复合物(生物素 - 链霉亲和素系统的亲和力极高,解离常数达 10⁻¹⁵M),保证了检测的灵敏度和特异性。
Sulfo-NHS-LC-Biotin 的水溶性使其在生物素化反应中具有广泛的适用性:在蛋白质生物素化中,可直接将试剂加入含目标蛋白质的缓冲液(如 PBS)中,在温和条件下(pH 7.0-9.0,室温孵育 30-60 分钟)即可完成修饰,反应后的产物通过透析或凝胶过滤层析去除未反应的试剂,得到生物素化蛋白质。例如,将抗体进行生物素化修饰后,可作为检测探针用于免疫分析(如 ELISA、免疫组织化学),通过生物素 - 链霉亲和素系统放大信号,提高检测的灵敏度。
在细胞生物学研究中,Sulfo-NHS-LC-Biotin 可用于标记细胞表面蛋白质:由于其水溶性好,无法穿透细胞膜(细胞膜为脂溶性屏障),加入细胞培养液后只会与细胞表面暴露的氨基发生反应,特异性标记膜蛋白,后续通过链霉亲和素 - 荧光染料偶联物或链霉亲和素 - 酶偶联物可检测膜蛋白的表达、分布及动态变化。例如,在研究细胞表面受体的内化过程时,用 Sulfo-NHS-LC-Biotin 标记受体后,通过荧光成像可追踪受体在细胞内外的运输轨迹。
在诊断试剂开发中,Sulfo-NHS-LC-Biotin 常用于制备生物素化抗原或抗体:将抗原生物素化后,可作为 ELISA 试剂盒中的包被抗原,通过生物素 - 链霉亲和素系统固定在酶标板上,提高包被的稳定性和均一性;生物素化抗体则可作为检测抗体,与酶标记的链霉亲和素配合使用,通过酶催化底物的显色反应实现对目标 analyte 的定量检测。
使用 Sulfo-NHS-LC-Biotin 时需注意反应条件的优化:反应 pH 需控制在 7.0-9.0 之间,过酸会导致 Sulfo-NHS 酯键水解,过碱则可能引起生物分子的氨基脱质子化,降低反应效率;试剂与生物分子的比例需根据生物分子的氨基数量调整,过量的试剂可能导致过度生物素化,影响生物分子的活性。此外,该试剂对光和温度较为敏感,需避光、-20℃冷冻保存,使用前避免反复冻融,以保持其反应活性。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。
更多推荐:
306776-79-4,DOTAGA-tetra(t-Bu ester)
NHS-SS-NHS,活性酯-双硫键-活性酯
Idasanutlin,1229705-06-9,依达奴林是RG7388 抑制剂
Magarose-NHS,预活化的琼脂糖磁性微球
95837-47-1,Cypate可以作为物,用于生物成像研究
小编:HLL 2025年8月18日