CY5标记的阿奇霉素，Cy5-Azithromycin的合成过程研究

Cy5-Azithromycin通过在阿奇霉素大环（15元内酯）侧链的可修饰羟基位点引入功能化连接臂，再与Cy5进行后续偶联得到。阿奇霉素含多个次级/伯羟基与一个叔胺性糖胺位点，直接与Cy5-NHS进行胺-酰活化酯反应并不可行（叔胺不生成稳定酰胺），因此通常采用“羟基→活化碳酸酯/氨基甲酸酯→末端伯胺/叠氮/炔基→与Cy5偶联”的两步或三步序列。为提升水溶性与降低聚集，常配置短PEG间隔臂；位点选择与保护-去保护策略决定了产物均一性，是工艺研究的重点。

合成过程研究

路径一（胺末端连接臂→Cy5-NHS）：

位点选择与选择性活化：对阿奇霉素易反应羟基（如2'-OH或3-OH，视底物与条件而定）进行碳酸化活化。常用DSC或pNPC，在干燥DCM/DMF中、0–5 °C与DIPEA配合，得到活性碳酸酯中间体；必要时以TBDMS或Ac保护其它羟基提升位点选择性。

接枝伯胺链：将HO-(PEG)n-NH2或H2N-(CH2)m-OH与活性碳酸酯中间体缩合，得到阿奇霉素-氨基甲酸酯-PEG-NH2（末端伯胺）。

与Cy5偶联：在无水DMF/DMSO中加入Cy5-NHS（或SE盐），用DIPEA缓冲至等效pH 8–8.5，室温避光反应，生成Cy5-Azithromycin酰胺键产物。

纯化与表征：制备型RP-HPLC分离；LC-MS确认分子量；1H NMR观察大环、糖、PEG与Cy5特征峰；UV-Vis/荧光核验光谱；HPLC纯度≥95%。

路径二（生物正交点击）：

在步骤1/2中将末端改为叠氮（通过氯甲酸酯与N3-PEG-OH或将伯胺转叠氮）或改为炔基（用Propargyl-PEG-OH接枝）。

与Cy5-DBCO（SPAAC）或Cy5-N3（CuAAC）偶联。CuAAC时以CuSO4/THPTA与温和还原剂体系，控制金属残留并对产物做金属去除（EDTA/固相树脂）。

与路径一相同的纯化/表征流程。

工艺要点与优化

— 选择性：通过短期保护策略或计量/温度/溶剂调控，减少多位点改性；

— 溶剂与含水量：全程低含水，避免内酯开环与染料水解；

— 比例与时间：Cy5通常3–5当量以驱动偶联，反应0.5–2 h；

— 成盐与稳定性：可进行对离子调整以改善溶解性与固体形态；

— 质量控制：建立光谱、HPLC与HR-MS放行标准，并记录残留铜/胺/溶剂水平。

产品名称：CY5标记的阿奇霉素

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23