CY5标记的阿西替尼，Cy5-Axitinib的合成及纯化过程

Cy5-Axitinib 是以小分子酪氨酸激酶抑制剂阿西替尼（Axitinib）为母体，在其分子结构上引入荧光探针Cy5的偶联衍生物。阿西替尼分子骨架含有吡啶、苯并咪唑及苯胺结构单元，具有多个潜在修饰点，其中芳胺和吡啶氮不适合直接用于与Cy5耦合，因此常通过人工引入连接臂来提供伯胺或叠氮/炔基功能。终产物既保留阿西替尼的疏水性小分子骨架，又具有Cy5强烈近红区荧光（λex≈650 nm, λem≈670 nm），适合药物分布、载体装载与表面修饰的研究。

合成过程

连接臂引入：

常见做法是在阿西替尼可修饰的芳胺位点或羟基衍生物上引入短链PEG连接臂。例如利用NHS-PEGn-COOH与Axitinib的可修饰氨基反应，得到Axitinib-PEG-NH2 中间体。

若直接位点限制明显，则先在阿西替尼合成的中间体阶段引入氨基/羟基功能化手柄，再进行终构建。

与Cy5偶联：

若中间体带伯胺，则在无水DMF/DMSO中与Cy5-NHS酯（或SE盐）反应，加入DIPEA作碱，室温避光搅拌1–2 h，形成稳定酰胺键连接的Cy5-Axitinib。

若中间体为叠氮或炔基衍生物，则分别与Cy5-DBCO（无铜SPAAC）或Cy5-N3（CuAAC，CuSO4/THPTA体系）进行点击反应，得到高效偶联产物。

纯化：

小分子产物：采用制备型RP-HPLC（C18柱，水/乙腈梯度+0.1%甲酸）进行纯化，收集荧光检测下单一主峰，蒸发或冻干得纯产物。

杂质去除：通过反复溶剂沉淀或透析去除未反应Cy5及副产物。若含金属残留（CuAAC条件），需经螯合树脂或EDTA洗脱去除铜离子。

表征与确认

UV-Vis吸收：在甲醇或PBS中检测，主峰在646–650 nm。

荧光发射：峰值在662–670 nm，确认染料完整性。

质谱（HR-MS/LC-MS）：检测分子量增加符合“阿西替尼+连接臂+Cy5”的加和。

NMR：在DMSO-d6中解析大环芳香区信号与连接臂信号，酰胺区-CO-NH-质子为关键特征。

HPLC纯度：多波长检测（280 nm与650 nm），目标峰单一且纯度≥95%。

产品名称：CY5标记的阿西替尼，Cy5-Axitinib

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

推荐产品：

CY3标记鸡卵清白蛋白，OVA-CY3， CY3-Ovalbumin

CY3标记积雪草酸 CY3-Asiatic acid

CY3标记几丁糖 CY3-Chitinbiose

CY3标记甲基丙烯酰化透明质酸 CY3-HAMA

CY3标记甲基四氮杂卓 Cy3-methyltetrazine

CY3标记金黄色葡萄球菌蛋白A，r-SPA， CY3-金黄色葡萄球菌蛋白A，r-SPA，

仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23