CF488A Tyramide Conjugates，酪胺修饰与偶联反应

CF488A Tyramide Conjugates 是一种基于酪胺信号放大（TSA, Tyramide Signal Amplification）技术的试剂，由绿色荧光染料 CF488A 与酪胺（tyramine）通过化学偶联形成。其制备过程旨在将高亮度、稳定的 CF488A 荧光团与具有反应活性的酪胺共价连接，以实现高灵敏度、低背景的。该制备方法通常包括染料活化、酪胺修饰、偶联反应、纯化与表征五个主要步骤。

一、原料与反应设计

CF488A 是一种具有优良光学性能的绿色荧光染料，激发峰约 490 nm，发射峰约 515 nm，分子中通常含有羧酸官能团，可通过活化形成易反应的中间体。酪胺分子则含有一个酚羟基与一个伯胺基团，其中胺基可作为亲核位点与活化的染料结合。
制备 CF488A Tyramide 的关键在于通过活化染料的羧基，使其能与酪胺的氨基发生高效缩合反应形成酰胺键，同时保持染料结构完整与光学性能稳定。

二、CF488A 染料的活化

1. 溶剂选择：
   将 CF488A 溶解于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中，浓度一般为 10–20 mM，以保证染料分子完全分散。

2. 活化试剂加入：
   加入等摩尔或稍过量的碳二亚胺类试剂（如 EDC，即 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide），用于活化羧基。为提高反应效率，通常还加入 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）或其改进形式（如 Sulfo-NHS），使羧基转化为活性酯中间体 CF488A-NHS Ester。

3. 反应条件：
   在惰性气氛（如氮气或氩气）下，于室温搅拌 1–2 小时，形成活化酯结构。该中间体稳定性有限，应在短时间内进入下一步偶联反应。

4. 三、酪胺修饰与偶联反应

5. 酪胺溶液配置：
   将酪胺溶解于无水 DMF 或含少量三乙胺的溶剂体系中，以保持胺基活性。

6. 偶联反应：
   将酪胺溶液缓慢加入活化的 CF488A-NHS 溶液中，控制摩尔比为 1.2:1（酪胺略过量）。反应体系维持在 pH 8–9 的弱碱性环境下，以促进胺基与活性酯缩合形成酰胺键。反应通常在室温下搅拌 4–6 小时。

7. 反应机理：
   酪胺的氨基对 CF488A 的活性酯羰基进行亲核攻击，生成稳定的酰胺键连接，从而实现 CF488A 与酪胺的共价偶联。该反应为单步缩合反应，副产物为 NHS 或其衍生物，易被后续纯化去除。

产品名称：CF488A Tyramide Conjugates

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09