BSA-SH，牛血清白蛋白修饰巯基的制备方法：

牛血清白蛋白修饰巯基是一种常用的蛋白质修饰衍生物，其基础是牛血清白蛋白分子。牛血清白蛋白是一种分子量约六万六千的球状蛋白，天然含有少量半胱氨酸残基和大量赖氨酸残基。通过化学方法在蛋白质表面引入额外巯基，可以提供可用于进一步共价偶联的活性位点，从而扩展蛋白质在生物标记、偶联和中的应用。BSA-SH 的结构在保持蛋白质整体三维构象稳定的同时，引入了可反应的硫醇功能，为后续与马来酰亚胺、活性卤代烷或其他巯基亲和试剂的反应提供条件。

BSA-SH 的制备主要依赖对牛血清白蛋白的巯基化修饰。常用方法是使用巯基引入试剂，如 2-巯基乙醇、巯基乙酸或含巯基的羧酸衍生物，这类试剂能够通过酰化或活化羧基与蛋白质赖氨酸残基上的氨基发生共价键形成反应。反应过程中，试剂的羧基或活性酯与蛋白质表面可反应的氨基结合，端基的巯基保持化学活性，形成 BSA-SH。

合成 BSA-SH 的过程一般包括蛋白质溶解、巯基引入反应、反应终止和产物纯化。首先，将牛血清白蛋白溶解在适当的缓冲液中，如磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液，以维持蛋白质稳定的三维结构。缓冲液的 pH 控制在七到八之间，有利于赖氨酸氨基的反应活性。其次，将巯基引入试剂溶液缓慢加入蛋白溶液中，并在适宜温度下充分搅拌，使化学反应均匀进行。反应时间一般为数十分钟到数小时，反应进程可通过小样品的紫外吸收或荧光分析进行监测，确保蛋白质未发生变性且巯基修饰量达到预期。

反应完成后，通过适当方法终止反应，例如加入小分子胺或稀释缓冲液，避免过量试剂继续与蛋白质反应。随后需要对 BSA-SH 进行纯化，以去除未反应试剂和副产物。常用方法包括透析、凝胶过滤或超滤，通过选择合适分子量截断的膜，可以有效分离小分子杂质，同时保持蛋白质结构和功能完整。产物纯化后，可通过 Ellman 试剂检测巯基含量，确认修饰效率和蛋白质的活性状态。

BSA-SH 的表征包括巯基含量测定、分子量分析和蛋白质结构稳定性评估。巯基含量可用 Ellman 试剂比色法或法进行定量。分子量可通过 SDS-PAGE 或质谱分析进行确认，验证蛋白质未发生交联或降解。蛋白质的二级结构可通过圆二色光谱分析，以确保修饰过程中结构保持稳定。此外，还可通过荧光或其他偶联实验验证巯基功能是否可用于后续反应。

BSA-SH 的研究表明，通过对牛血清白蛋白进行巯基化修饰，可以在保持蛋白质稳定性的前提下引入可反应硫醇，为蛋白质偶联、和材料表面修饰提供便利条件。合成过程可调节巯基化程度、反应时间和缓冲条件，从而获得不同功能化程度的 BSA-SH，用于后续实验设计。该方法具有可重复性强、操作条件温和和产物稳定的特点，是蛋白质化学修饰研究中常用的策略之一。

产品名称：BSA-SH

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.09