产品名称:CY7修饰次黄嘌呤,CY7偶联次黄嘌呤Hypoxanthine的合成策略与纯化方法
1. 核心结构与偶联机制
CY7(花菁染料Cy7)
荧光特性:近红外激发(720-750 nm)/发射(780-800 nm),组织穿透深度高,适合活体成像;光稳定性良好,兼容荧光显微镜、光声成像及近红外成像系统。
反应基团:含羧基(-COOH)、琥珀酰亚胺酯(NHS酯)或马来酰亚胺基团,可与次黄嘌呤的氨基(-NH₂)、羟基(-OH)或巯基(-SH)发生共价偶联。
功能扩展:通过PEG链引入靶向配体(如抗体、多肽)或刺激响应基团(如双硫键、偶氮苯),实现靶向递送或环境响应释放。
次黄嘌呤(Hypoxanthine)
化学特性:嘌呤类似物(分子式C₅H₄N₄O),含氨基和羟基,参与嘌呤代谢(如DNA/RNA合成、黄嘌呤氧化酶通路),可作为别嘌醇的代谢前体或某些酶(如黄嘌呤磷酸核糖转移酶)的底物。
生物活性:偶联后需保留其代谢识别能力,避免破坏与酶的结合位点;可作为生物标志物追踪嘌呤代谢异常(如痛风、Lesch-Nyhan综合征)。
偶联机制
酰胺键/酯键形成:CY7羧基经EDC/NHS活化生成NHS酯,与次黄嘌呤氨基或羟基发生亲核取代,形成稳定共价键;或通过酸催化直接酯化。
点击化学:利用DBCO-N₃与叠氮基团的环加成反应,实现无铜偶联,提升生物相容性。
硫醚键偶联:CY7马来酰亚胺基团与次黄嘌呤巯基反应,形成硫醚键,增强稳定性。
2. 合成策略与纯化方法
合成路径
两步法:
活化反应:CY7羧基经EDC/NHS活化生成活性酯,或次黄嘌呤氨基经Boc保护后引入叠氮基团。
偶联反应:活化CY7与次黄嘌呤在DMF/PBS混合溶剂中反应,或通过点击化学实现特异性连接;反应条件(pH 8.0-9.0、室温/37℃)需避免羧基水解或副反应。
连接臂设计:引入PEG链(如PEG₂₀₀₀)或柔性烷基链,减少空间位阻,保留荧光特性与代谢活性。
纯化工艺
透析/超滤:截留分子量3500 Da透析袋去除小分子杂质,PBS缓冲液4℃避光操作。
凝胶过滤色谱(GFC):Sephadex G-25柱基于分子尺寸分离,紫外检测280 nm(次黄嘌呤)与750 nm(CY7)。
高效液相色谱(HPLC):反相C18柱乙腈/水梯度洗脱,检测波长254 nm(次黄嘌呤)与750 nm(CY7),纯度≥95%。
冷冻干燥:低温真空保存,避免反复冻融导致结构破坏。

关于我们:
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