英文名称:Human GUCY2C/Guanylyl cyclase C Protein, His Tag Star Staining
中文名称:荧光染料FITC标记的带有His标签的人GUCY2C/鸟苷酸环化酶C蛋白(星染色)
GUCY2C蛋白结构功能特性
人源鸟苷酸环化酶C(Guanylyl Cyclase C, GUCY2C)是一种I型跨膜受体蛋白,属于鸟苷酸环化酶家族,通过催化GTP合成第二信使cGMP介导信号转导 。该蛋白由胞外结构域(Ser24-Gln430)、单次跨膜区和胞内激酶样结构域及环化酶催化域组成,理论分子量约48.8 kDa,但由于高度糖基化修饰,实际电泳迁移率位于70-80 kDa区间 。GUCY2C特异性表达于肠道上皮细胞顶膜,在结直肠癌中保持近100%的表达率,且因肿瘤细胞极性丧失而分布于整个细胞表面,成为靶向治疗的理想抗原 。
定制服务能力
我们提供基于Star Staining标记平台的新一代位点特异性FITC标记服务,区别于传统随机赖氨酸标记,采用精准化学偶联技术确保标记位点均一性。针对GUCY2C-His标签蛋白,我们可提供:
表达系统定制:HEK293哺乳动物细胞表达(确保正确折叠与糖基化)、CHO细胞表达、昆虫细胞表达系统
标签方案优化:N端/C端His标签(6×His或8×His)、双标签设计(His-Avi标签组合用于生物素化二次标记)
FITC标记工艺控制:异硫氰酸荧光素(FITC)通过异硫氰酸基团与蛋白氨基形成稳定硫脲键,反应pH 8.5-9.5,标记摩尔比(F/P值)精准控制在3-6区间,避免过度标记导致的荧光淬灭
质控体系:SDS-PAGE纯度验证(≥95%)、HPLC纯度分析、质谱分子量确认、荧光光谱表征(激发/发射波长495/519 nm)、内毒素检测(<1 EU/μg)
定制化案例展示
案例一:结直肠癌靶向ADC药物开发配套试剂定制
为某生物医药企业定制GUCY2C-His-FITC蛋白(货号:QYY-GUCY2C-F1),用于抗体药物偶联物(ADC)的内化效率评估。采用HEK293表达系统,C端8×His标签,FITC标记后F/P比=4.2。该批次蛋白成功用于流式细胞术检测抗GUCY2C抗体与HCT116细胞的结合及内化动力学研究,支持其双特异性CDH17-GUCY2C ADC项目的先导化合物筛选 。
案例二:CAR-T细胞治疗靶点验证试剂
为细胞治疗研发机构提供低内毒素级GUCY2C-His-FITC(内毒素<0.1 EU/μg),用于CAR-T细胞与靶细胞共培养体系的实时成像。通过Star Staining平台实现位点特异性标记,避免传统标记对蛋白胞外结构域的空间位阻,确保与抗GUCY2C scFv结合域的免疫活性。该试剂成功应用于GUCY2C靶向CAR-T细胞的特异性杀伤功能验证及脱靶毒性评估 。
案例三:肿瘤微环境研究多色标记体系
定制GUCY2C-His-FITC与生物素化GUCY2C-His-Avi双功能试剂组合,用于结直肠癌类器官模型的受体分布研究。FITC标记蛋白用于活细胞表面受体动态追踪,生物素化版本用于固定后免疫组化共定位分析。通过统一的His标签纯化体系,确保两批次蛋白糖基化模式一致性,解决肿瘤微环境中GUCY2C极性分布机制的研究需求。
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