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5-FAM NHS Ester,5-羧基荧光素活性酯,5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
发布时间:2025-09-10     作者:HLL   分享到:

产品名称:5-羧基荧光素活性酯,5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯

英文名称:5-FAM NHS Ester

5-FAM NHS Ester 是 5 - 羧基荧光素的琥珀酰亚胺活性酯衍生物,核心功能是通过活性酯与生物分子的氨基(-NH₂)特异性反应,实现高效,广泛用于抗体、蛋白质、多肽等含氨基生物分子的修饰,是免疫分析与生物分子示踪的基础工具。分子特性上,NHS 活性酯(-O-NHS)显著提高羧基的反应活性,无需偶联剂即可与氨基在生理 pH(7.0-8.0)下快速反应(动力学常数约 10⁴ L/(mol・s)),形成稳定的酰胺键;5-FAM 荧光性能优异 ——494nm 激发、518nm 发射,量子产率约 0.79,抗光漂白能力强,标记后对生物分子活性影响极小(活性保留率≥90%);探针水溶性较好(生理缓冲液中溶解度约 100μmol/L),适合批量标记实验。

制备过程需控制活性酯稳定性与异构体纯度:以高纯度 5-FAM(HPLC 分离 6 - 异构体,纯度≥98%)为原料,与 NHS(N - 羟基琥珀酰亚胺)在 DCC(二环己基碳二亚胺)催化下反应生成活性酯。反应需在无水二氯甲烷中进行,温度控制在室温(25℃),反应时间 4-6 小时;纯化采用制备型反相 HPLC(流动相为乙腈 / 水),去除未反应的 5-FAM 与 NHS;产物需避光冷藏保存(-20℃),防止活性酯水解;通过质谱验证分子质量(理论值 = 5-FAM 分子量 + NHS 分子量 - 18),并通过氨基反应实验验证标记效率(与牛血清白蛋白反应,标记率≥3 个荧光分子 / 蛋白分子)。

应用场景覆盖多领域氨基分子标记:在免疫荧光检测中,可直接标记抗体的氨基(如抗 GFP 抗体),制备荧光二抗,用于细胞内 GFP 融合蛋白的定位 —— 例如观察绿色荧光蛋白在神经元突触中的分布,荧光信号强且背景低;在蛋白质芯片制备中,可标记含氨基的蛋白质探针,固定在芯片表面,通过荧光信号检测目标蛋白的结合,提高芯片检测灵敏度(检测限可达 pg/mL 级别);在多肽药物研发中,可标记含氨基的治疗性多肽(如胰岛素样生长因子),追踪多肽在动物体内的组织分布与代谢路径,评估其生物利用度;在核酸标记中,可标记 5' 端氨基修饰的 DNA 探针,用于荧光原位杂交(FISH)实验,检测染色体微小缺失或易位,为遗传病诊断提供精准依据;此外,还可用于流式细胞术,标记细胞表面含氨基的受体(如 CD44),量化受体表达水平,辅助肿瘤细胞分型。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

5-FAM NHS Ester

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小编:HLL 2025年9月9日

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